Персональный сайт врача дерматовенеролога Агапова С.А.   прием   консультации   форум главная страница  карта сайта  поиск по сайту  написать письмо
Информация о половых инфекциях и болезнях кожи

Запись на прием к дерматовенерологу Агапову С.А.

AgapovMD.RU
Все новости

Видимые признаки нейросифилиса

Экстрагенитальные шанкры первичного сифилиса

Клинические рекомендации по лечению гонококковой инфекции

Клинические рекомендации по лечению баланопостита

Сифилис ногтей

Влияние антибиотиков на показатели спермограммы у мужчин с урогенитальными инфекциями

Дифференциальная диагностика заболеваний полового члена

Генитальная микоплазма


Иммуноферментный анализ (ИФА)
Enzyme immunoassay (EIA)

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Что такое иммуноферментный анализ (ИФА)
Как проводится исследование методом ИФА
Какие инфекции можно выявить методом ИФА
Как интепретировать результаты ИФА
Какая роль метод ИФА в диагностике сифилиса
Где можно получить еще информацию

Что такое иммуноферментный анализ

Иммуноферментный анализ (ИФА) - лабораторное исследование основаное на высокой избирательности и специфичности иммунологических реакций “антиген-антитело”.
Различают несколько десятков модификаций ИФА.Наибольшее распространение получил твердофазный гетерогенный иммунный анализ - ELISA (enzyme linked immunosorbent assay). ИФА применяют для двух целей - для определения наличия антигенов возбудителей различных инфекций,но значительно чаще метод ИФА применяется для определения наличия антител классов ( IgA IgM IgG)  к антигенам различных возбудителей болезней.С помощью ИФА можно определить антитела к любой половой инфекции (при условии,конечно,что организм их выработал) подробнее в статье Иммуный ответ при половый инфекциях.

Как проводится исследование методом ИФА

Механизм реакции

В основе иммуноферментного анализа лежит иммунная реакция антигена с антителом,а присоединение к антителам ферментной метки позволяет учитывать результат реакции антиген-антитело по появлению ферментативной активности или по изменению ее уровня.В упращенном виде механизм реакции можно представитьследующим образом:

 Первая реакция происходит между определяемым Ig (Ab) и очищенным антигеном возбудителя (Ag), фиксированным к поверхности лунок иммунологического планшета

Для выявления образовавшихся иммунных комплексов проводят вторую иммунологичесую реакцию, в которой в качестве антигена выступает связавшийся специфический Ig, а в качестве антител к нему — коньюгат, представляющий собой Ig (Ab) к соответствующему Ig человека, меченный ферментом -пероксидазой (K)
 

Далее происходит ферментативная реакция, катализируемая ферментной частью молекулы коньюгата.Субстратом данной реакции служит бесцветное вещество — хромоген, который в ходе реакции образует окрашенное вещество. Интенсивность окраски в лунке определенным образом зависит от количества содержащихся в пробе иммуноглобулинов.

Подсчет результатов


положительный результат окрашивание


 отрицательный
результат - отсутствие
окрашивания

После остановки реакции проводят фотометрирование лунок с помощью специальных приборов.для учета результатов используют специальные приборы.При сравнении со значений оптической плотности контрольных проб проводят математическую обработку результатов анализа. Чем выше оптическая плотност в данной ячейки, тем большее количество специфических антител содержится в пробе

Проведение иммуноферментного анализа

Для серодиагностике используются 96 луночные полистирольные планшеты, на стенках ячеек которых заранее адсорбируется антиген. Исследуемая сыворотка вносится в ячейку планшета. При этом гомологичные антигену антитела прикрепляются к нему. Не прикрепившиеся антитела удаляются промыванием. Далее в ячейки вносят антитела против иммуноглобулинов (антител) человека, меченные ферментом. Если в исследуемой сыворотке присутствовали определяемые антитела, то они на этом этапе выступят в роли антигенов, с которыми прореагируют меченные антитела. Добавление после промывки хромогенного вещества (красителя) позволит учесть реакцию по развивающемуся окрашиванию в ячейках. Интенсивность окраски при этом пропорциональна количеству фермента, а следовательно количеству антител.При измерении оптическую плотности (ОП) жидкости в ячейке и сравнивании ее с контрольным образцом подсчитывается концентрация антител в единицах объема.Наиболее часто применяется подсчет результатов в единицах оптической плотности.Надо учитывать,что для каждой тест-системы есть свои показатели учета результатов и показатели нормы и патологии на которые надо ориентироваться при интерпретации результатов.

Какие инфекции можно выявить методом ИФА

В основном в современной венерологии применяется для диагностики сифилиса (в комплексе с другими реакциями),ВИЧ-инфекции,вирусных гепатитов.Имеет ограниченное значение для диагностики хламидийной инфекции,цитомегаловирусной инфекции и других герпетических инфекций.Метод ИФА используется также для определения антител при различных инфекционных заболеваниях,уровня гормонов,аутоантител и различных маркеров онкологических заболеваний.

Определение наличия и уровня антител в крови не рекомендуется примененять для первичной диагностики инфекций,передающихся половым путем.Единственное исключение - по результатам ИФА возможно рспознавание сифилиса в комплексе с реакцией микропреципитации .Но необходимо отметить, что наличие антител в сыворотке крови может свидетельствовать только о контакте организма с возбудителем.в настоящее время или в прошлом.

Как интерпретировать результаты ИФА

Исследование наличия и уровня антител различных классов в некторых случаях помогает определить стадии инфекционного процесса

Стадия заболевания

 IgM

 IgA

 IgG

Первичная фаза
(2 недели от инфицирования)

  -

 +

 -

Первичная фаза
( 2,5 - 3 недели от инфицирования)

+

+

 -

Первичная фаза
( 3-4 недели от инфицирования)

+

+

+

Обострение хронической фазы
( 2 недели от начала обострения)

-

+

+

Хроническая фаза

-

+/-

+

Прошедшая (излеченная инфекция)

-

-

+

Выздоровление

-

снижение титра в 2-4 раза после успешного лечения
 

снижение титра в 4-8 раз через 1-1.5 мес после успешного лечения

Отрицательный результат

-

-

-

К сожалению,такое важное преимущество ИФА, как количественное определение антител не имеет большого значения в практической работе - т.е. не позволяет точно установить диагноз и не влияет на дозировку и сроки назначения лекарственных средств.

Какая роль метод ИФА в диагностике сифилиса

Метод ИФА в диагностике сифилиса был впервые применен в 1975 год.В настоящее время он широко применяется для серологической диагностики сифилиса в России и используется как потверждающий тест на сифилис.Обычно проводят исследование,выявляющее так называемые суммарные антитела к антигенам бледной трепонемы (IgM и IgG),хотя в отдельных случаях возможно и определение только "ранних" антител класса М.ИФА при сифилисе становится положительным после 3 недели с момента инфицирования и остается положительным довольно длительное время даже после лечения (иногда всю жизнь).Поэтому как тест,подтверждающий излечение сифилиса,ИФА не используется.В большинстве случаев проводится только качественное определение ИФА - т.е. только положительный или отрицательный результат,хотя возможно и количественное определение.

Где можно получить еще информацию

посещений  223261 обновлено 01.07.10


Агапов С.А. © 2004-2017 VENURO.RU - информация о половых инфекциях

Врач дерматовенеролог Агапов Сергей Анатольевич
т.+7 (863) 256-40-89  ,+7(928)121-89-41  agapovmd@gmail.com
344023,г.Ростов-на-Дону,пр.Ленина,251 (схема проезда)
Запись на прием дерматовенеролога в г.Ростове-на-Дону

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ.ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ С ВРАЧОМ.

Запрещено пользоваться любым материалом сайта в виде копирования страниц или статей целиком без письменного согласия автора.При цитировании отдельных частей гиперссылка на сайт VENURO.RU обязательна.Профессиональная информация не должна применятся для самодиагностики и самолечения.

All contents © copyright 2004 - 2014  VENURO.RU  the information on sexual infections
Design, programming and promotion by S.Agapov, MD

Наверх страницы

Яндекс.Метрика