Персональный сайт врача дерматовенеролога Агапова С.А.   прием   консультации   форум главная страница  карта сайта  поиск по сайту  написать письмо
Информация о половых инфекциях и болезнях кожи

Запись на прием к дерматовенерологу Агапову С.А.

AgapovMD.RU
Все новости

Видимые признаки нейросифилиса

Экстрагенитальные шанкры первичного сифилиса

Клинические рекомендации по лечению гонококковой инфекции

Клинические рекомендации по лечению баланопостита

Сифилис ногтей

Влияние антибиотиков на показатели спермограммы у мужчин с урогенитальными инфекциями

Дифференциальная диагностика заболеваний полового члена

Генитальная микоплазма


Бактериологический посев - Бакпосев
Microbiological culture

Бактериологический посев

Что такое бактериологический посев
Какие показания к проведению бак.посева
Как проводится бактериологический посев
Как проводится подсчет результатов
Что такое колониеобразующие единицы (КОЕ)
Что такое антибиотикограмма
Где можно получить еще информацию

Что такое бактериологический посев

Бактериологический посев (культуральное или микробиологическое исследование) - лабораторное исследование,при котором биоматериал,в котором предположительно могут находиться патогенные микроорганизмы,помещают в благоприятную для их размножения среду при определенных температурных параметрах с последующей оценкой результатов и определения чувствительности к антибактериальным препаратам.

Всемирная организация здравоохранения

Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) из-за высокой цены и длительного срока проведения не рекомендует применять культуральное исследование в повседневной практической практике при наличии других методов диагностики (окраска по Граму,ПЦР) и при выраженной клинической картине заболевания.

Метод ценен для определения условно-патогенной микрофлоры,определения чувствительности к антибиотикам.Постепенно в практике заменяется полимеразной цепной реакцией (ПЦР)Преимуществом культурального метода явялется относительно высокая специфичность исследования и возможность лабораторного моделирования терапевтического воздействия на микроорганизмы и учет его эффективности - т.е. то,что обычно называют антибиотикограммой.
Недостатками являются длительность исследования,высокие требования к забору материала,повышенные требования к квалификации персонала лабораторий,что ведет к значительному удорожанию стоимости исследования и удлинению сроков лечения.
Лично я скептически отношусь к проведению различных бактериологических исследований,так как в большинстве случаев проблему излечения пациента удается решить в сроки,когда результаты бактериологического исследования еще не готовы.

Какие показания к проведению бактериологического посева

В современной венерологии редко приходится прибегать к бактериологическому методу исследования.По моему мнению в России отмечается некоторое злоупотребление этим методом,связанное с коммерческим интересами лабораторий и нежеланием или незнанием врачами методов синдромной диагностики и лечения половых инфекций.
Несомненными показаниями к проведению бактериологического исследования являются два заболевания : воспалительные заболевания малого таза у женщин и простатит у мужчин.С юридической точки зрения бактериологическое подтверждение диагноза гонококковой инфекции требуется при обнаружении в мазке грамотрицательных диплококков у девочек, пожилых женщин и беременных .В некоторых случаях исследование необходимо при хроническом,торпидном уретрите у мужчин и рецидивирующем вульвовагините у женщин.

Как проводится бактериологический посев

Материал  для исследования:отделяемое из очагов поражения.Материал может браться не только из половых органов,но и из полости рта,прямой кишки.Правила забора аналогичны забору при ПЦР-диагностике.Сроки выполнения различны от нескольких дней до нескольких недель(зависят от определяемого возбудителя).Для забора материала используются стерильные специальные инструменты или тампоны.Материал помещают в транспортную среду,если забор проводится вне лаборатории и  в дальнейшем его помещают в специальные питательные среды.В зависимости от задач исследования применяют множество сред с добавлением различных биопрепаратов и химических соединений.Питательная среда с внесенным материалам помещается в специальные приборы(термостаты),в которых создается и автоматически поддерживаются условия,необходимые для размножения микроорганизмов (температура,влажность,газовая смесь и.т.д.).По истечению определенного времени  проводят контрольные проверки-осмотры питательных среды.Рост микроорганизмов происходит в виде так называемых колоний,обладающих видимыми характеристиками - размер,плотность,форма,цвет и.т.д.При необходимости проводится микроскопическое исследования материала,взятого из колоний с окраской специальными красителями.Для того,чтобы дифференцировать микроорганизмы,сходные по типу колоний и (или) микроскопической картине проводят дополнительное исследования по способностям микроорганизмов разлагать некоторые неорганические и органические соединения - так называемое исследование с помощью биохимического ряда.Для определения количественных показателей используют различные методы,о которых сказано ниже.Выделенный и определенный микроорганизм называют культурой.
Задача упрощается в тех,случаях,когда посев материала проводят на специальные среды,на которых могут размножаться только определенные виды микробов.(например среда Маккоя для определения хламидий).

Как проводится подсчет результатов

Интерпретация результатов микробиологического исследования материалов, полученных при обследовании половых органов представляет определенные трудности,и, в значительной мере, зависит от опыта врача-лаборанта и правильности техники проведения исследования.В результате проводимого исследования  определяется микроорганизм или микроорганизмы,по наличию которых можно предполагать,что он (они) являются причиной патологических изменений в мочеполовых органах.В большинстве случаев помимо качественного определения (наименования микроорганизма) проводят и количественную оценку культуры.Наиболее простым методом оценки является определения степени роста:

Степень

Характеристика

I
Очень скудный рост - рост только на жидких средах; на плотной питательной среде рост отсутствует.
II

На плотной питательной среде рост до 10 колоний микроорганизмов определенного вида.

III

 На плотной питательной среде рост от 10 до 100 колоний.

IV

 На плотной питательной среде рост более 100 колоний.

В случае роста условно-патогенных микроорганизмов I и II степени роста чаще всего свидетельствуют о загрязнении, III и IV степени роста - об этиологической роли данного микроорганизма в воспалительном процессе.

Что такое колониеобразующие единицы (КОЕ)

Колониеобразующая единица (colony-forming unit -CFU) - одна живая микробная клетка, из которой вырастает колония,по другим определениям - видимая колония микроорганизмов, выросшая из одной клетки или из группы клеток.Определение КОЕ теоретически позволяет определить концентрацию(количество)  микроорганизмов в единице объема.Если определения количества микроорганизмов например в 1 мл мочи или в 1 мл спермы не вызывает возражений и может приниматься во внимание при определении тактики лечения заболевания,то количественное определение микроорганизмов в отделяемом из половых органов (влагалища,уретры) вызывает большие сомнения - так в любом случае,независимо от методов подсчета,определяется количество микроорганизмов только во взятой пробе из половых органов,а не во влагалище,цервикальном канале или уретре в целом.

Поэтому определение различных "титров", "степеней",
"количества" микроорганизмов в пробах,взятых из отделяемого влагалища и уретры не имеет никакого практического значения ни для диагностики мочеполовых инфекций,ни для назначения лечения,ни для контроля их излеченности.

Подсчет КОЕ проводят несколькими методами:

Метод серийный разведений

Из транспортной среды,содержащей биоматериал берется 1 мл,который последовательно разбавляется в 10 раз с посевом в пронумерованные пробирки с питательной средой.Та пробирка,в которой прекращается рост микроорганизмов считается максимальной границей количества микроорганизмов в пробе.Для примера количество концентрация микроорганизмов в нижеприведенной таблице составляет 10х 6

 №

10x1

10x2

10x3

10x4

10x5

10x6

10x7

10x8

10x9

 рост

 +

 +

 +

 +

 +

 +

 -

 -

 -

Этот же метод серийных разведений применяется для определения чувствительности к антибиотикам (определяется минимальная ингибирующая концентрация)

Метод подсчета колоний под микроскопом

Метод является ориентировочным и заключается в подсчете колоний под микроскопом под увеличение 10 х в поле зрения с последующей интерпретацией по сравнительной таблице.

Количество колоний

Концентрация в КОЕ/мл

1

10 x 3

1-5

10 x 4

5-15

10 x 5

>15

10 x 6

Секторный метод (метод Gould)

По существу является вариантом метода серийных разведений.Применяется для микробиологического исследования мочи.Платиновой петлей диаметром 2 мм, емкостью 0,005 мл берут каплю мочи и делают 30-40 штрихов на сектор А чашки Петри. Прожигают петлю и производят 4 штриха через сектор А в сектор I. Аналогичным образом из сектора I засевают  сектор II, а из сектора II - сектор III. Чашки инкубируют при 37 оС  24 часа. При отсутствии роста на кровяном агаре инкубацию пролонгируют до 3 суток.  Учет результатов проводят по специальной  таблице.

А

1 сектор

2 сектор

3 сектор

кол-во в 1 мл

 1-6

 -

 -

 -

 <1000

 8-20

 -

 -

 -

 3000

 20-30

 -

 -

 -

 5000

 30-60

 -

 -

 -

 10000

 70-80

 -

 -

 -

 50000

 100-150

 5-10

 -

 -

 100000

 не сосч.

 20-30

 -

 -

 500000

 -"-

 40-60

 -

 -

 1 млн

 -"-

 100-150

 10-20

 -

 5 млн

 -"-

 не сосч.

 30-40

 -

 10 млн

 -"-

 -"-

 60-80

 ед.кол.

 100 млн

Что такое антибиотикограмма

Относительно ценным преимуществом метода бактериологического посева является определение чувствительности к антибиотикам.Перечень антибактериальных препаратов,к которым чувствителен (или не чувствителен) выделенный микроорганизм носит название антибиотикограммы.Обычно результаты антибиотикограммы выражают в единицах минимально ингибирующей концентрации (МИК).

Однако чувствительность in vitro (в пробирке) и in vivo (в организме) разные вещи.Все дело в биодоступности препарата - нам важно знать какая концентрация в минимально ингибирующих единицах будет непосредственно в очагах поражения у индивидуального пациента,а не пробирке с питательной средой.На настоящее время методов,позволяющих определить эту концентрацию непосредственно в организме пациента, к сожалению,нет.Поэтому выявленная  чувствительность к антибиотикам, не всегда соответствуект реальности,так как она определяется в пробирке,а не пораженном органе.Ввиду разной биодоступности препаратов - т.е. способности их проникать в очаги поражения,препараты с низкой МИК in vitro (в пробирке) - к которым определена высокаяч чувствительность микроорганизмов, могут быть совершенно неэффективны при  практическом применении (in vivo).

Для определения чувствительности к антибиотикам микроорганизмам применяют следующие методы:

Метод стандартных дисков

В  чашки с питательной средой засевают микроорганизмы,к которым необходимо определить чувствительность к антибиотикам.На поерхность среды помещают стандартные диски,пропитанные растворами антиюбиотиков в различных концентрациях.Антибиотик проникает питательную среду и вызывает прекращение роста чувствительного к нему микроорганизма.Измеряя диаметр зоны задержки роста вычисляют уровень чувствительности микроорганизма к данному антибиотику.

Диффузионный метод (Е-тест)

При этом методе используют полоски из бумаги,пропитанной различными концентрациями антибиотиков.Полоски помещают в питательную среду и по измению зоны роста определяется уровень чувствительности микроорганизма к антибиотику.

Метод серийных разведений

Сущность метода описана выше.Является макисмально точным из всех предложенных методов.

  • Use of the diagnostic bacteriology laboratory:a practical review for the clinician  Full text

посещений  210589 обновлено 11.06.10


Агапов С.А. © 2004-2017 VENURO.RU - информация о половых инфекциях

Врач дерматовенеролог Агапов Сергей Анатольевич
т.+7 (863) 256-40-89  ,+7(928)121-89-41  agapovmd@gmail.com
344023,г.Ростов-на-Дону,пр.Ленина,251 (схема проезда)
Запись на прием дерматовенеролога в г.Ростове-на-Дону

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ.ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ С ВРАЧОМ.

Запрещено пользоваться любым материалом сайта в виде копирования страниц или статей целиком без письменного согласия автора.При цитировании отдельных частей гиперссылка на сайт VENURO.RU обязательна.Профессиональная информация не должна применятся для самодиагностики и самолечения.

All contents © copyright 2004 - 2014  VENURO.RU  the information on sexual infections
Design, programming and promotion by S.Agapov, MD

Наверх страницы

Яндекс.Метрика